Permite conocer los cultivos celulares, la extracción de ácidos nucleicos y proteínas, la pcr y electroforesis, las enzimas de restricción y clonación del adn, los marcadores moleculares e hibridación del adn, la secuenciación de adn, las técnicas de análisis cromosómico, la bioinformática y las aplicaciones de la biología molecular y citogenética, entre otros aspectos relacionados.
El Programa está especialmente diseñado para aquellas personas que estén interesadas en adquirir conocimientos sobre Biología Molecular y Citogenética y que quieran asegurarse un recorrido ascendente en esta área, con una especial elevación y consolidación de competencias.
MÓDULO 1. LABORATORIOS DE BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA
UNIDAD DIDÁCTICA 1. DEFINICIÓN
1. Conceptos básicos
UNIDAD DIDÁCTICA 2. LABORATORIO DE BILOGIA MOLECULAR
1. Equipamiento
-Equipamiento específico
-Equipamiento genérico
2. Organización espacial
3. Flujo de trabajo
4. Condiciones de trabajo
-Contaminación muestral
-Procedimientos de asepsia
5. Optimización de recursos
UNIDAD DIDÁCTICA 3. LABORATORIO DE CITOGENÉTICA Y CULTIVOS CELULARES
1. Instrumental
-Instrumental específico para cultivos celulares
-Instrumental específico para citogenética
-Instrumentación general
2. Estructura
3. Hábitos de trabajo
UNIDAD DIDÁCTICA 4. PROTOCOLOS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
1. Categorización
-Seguridad biológica
-Seguridad química
2. Equipo y normativas de seguridad
3. Manual de seguridad
4. Plan de gestión de residuos
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 2. CULTIVOS CELULARES
UNIDAD DIDÁCTICA 1. MARCO CONCEPTUAL
1. Células
-Clasificación
-Anatomía de la célula humana
UNIDAD DIDÁCTICA 2. CULTIVO CELULAR
1. Tipologías
-Cultivo de órganos
-Cultivo de explantes
-Cultivo de células
2. Aplicaciones
UNIDAD DIDÁCTICA 3. BIOLOGÍA DE LAS CÉLULAS DE CULTIVO
1. Curva de crecimiento del cultivo
2. Formas de crecimiento
-Crecimiento en monocapa
-Crecimiento en suspensión
3. Comportamiento vital tras sucesivos pases
-Línea celular primaria
-Línea celular continua
UNIDAD DIDÁCTICA 4. FACTORES QUE INTERVIENEN EN EL CULTIVO
1. Soporte físico
-Características y categorización
2. Composición y propiedades
3. Atmósfera gaseosa
4. Condiciones de incubación
UNIDAD DIDÁCTICA 5. OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LAS CÉLULAS PARA EL CULTIVO
1. Disgregación celular
-Metodologías
-Selección celular
2. Densidad y viabilidad celular
-Colorante vital
-Contaje
3. Descongelación de células
4. Sembrado celular
UNIDAD DIDÁCTICA 6. MANTENIMIENTO Y PROPAGACIÓN DEL CULTIVO CELULAR
1. Control periódico microscópico
2. Cambio de medio
3. Subcultivo
-Cultivos en suspensión
-Cultivos en monocapa
4. Procedimiento de tripsinización
5. Conservación celular
UNIDAD DIDÁCTICA 7. CONTAMINACIÓN DE CULTIVOS
1. Bacterias, levaduras y hongos
2. Microplasmas
3. Virus
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 3. INTRODUCCIÓN A LA CITOGENÉTICA HUMANA
UNIDAD DIDÁCTICA 1. INTRODUCCIÓN
UNIDAD DIDÁCTICA 2. CROMOSOMA
1. Estructura
2. Tipos
3. Número de cromosomas
UNIDAD DIDÁCTICA 3. CICLO CELULAR
1. Interfase
-Periodo G1
-Periodo S
-Periodo G2
2. Mitosis
-Profase
-Metafase
-Anafase
-Telofase
UNIDAD DIDÁCTICA 4. TINCIÓN Y BANDEO CROMOSÓMICO
1. Métodos convencionales de tinción
2. Técnicas de bandeo cromosómico
-Bandeo G
-Bandeo R
-Bandeo Q
-Bandeo C
UNIDAD DIDÁCTICA 5. IDIOGRAMA Y NOMENCLATURA DE BANDAS
1. Orígenes del ISCN
2. Clasificación y codificación de cromosomas
UNIDAD DIDÁCTICA 6. MUTACIONES CROMOSÓMICAS
1. Mutaciones numéricas
-Poliploidía
-Aneuploidía
2. Mutaciones estructurales
-Deleción
-Duplicación
-Inversión
-Translocación
-Cromosoma en anillo
-Isocromosoma
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 4. TÉCNICAS ANÁLISIS CROMOSÓMICO
UNIDAD DIDÁCTICA 1. CONCEPTO DE CARIOTIPO
1. Indicaciones para realizar un cariotipo
UNIDAD DIDÁCTICA 2. OBTENCIÓN DEL CARIOTIPO
1. Cariotipo constitucional estándar
-Cultivo de linfocitos
-Obtención de extensiones de metafases
-Tinción y bandeo cromosómicos
-Análisis cromosómico
2. Fórmula cromosómica
3. Cariotipo de alta resolución
UNIDAD DIDÁCTICA 3. AUTOMATIZACIÓN DEL ANÁLISIS CITOGENÉTICO
1. Software especializados
2. Técnicas de captura de imagen
3. Análisis asistido por computadora
4. Integración de bases de datos
UNIDAD DIDÁCTICA 4. TÉCNICAS DE CITOGENÉTICA MOLECULAR
1. Hibridación in situ fluorescente (FISH)
2. Array
3. Hibridación genómica comparativa (CGH)
UNIDAD DIDÁCTICA 5. CITOGENÉTICA APLICADA AL DIAGNÓSTICO PRENATAL
1. Métodos de muestreo prenatal
-Amniocentesis
-Biopsia de vellosidades coriónicas
2. Obtención del cariotipo fetal
-Cariotipo de vellosidad coriónica
-Cariotipo de líquido amniótico
3. Diagnóstico molecular prenatal y consejería genética
UNIDAD DIDÁCTICA 6. CITOGENÉTICA Y CÁNCER
1. Alteraciones cromosómicas relacionadas con el cáncer
2. Complejidad del cariotipo tumoral
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 5. ÁCIDOS NUCLEICOS Y ENZIMAS ASOCIADAS
UNIDAD DIDÁCTICA 1. ÁCIDOS NUCLEICOS
1. Bases estructurales
-Base nitrogenada
-Pentosa
-Ácido fosfórico
-Nucleósidos
-Nucleótidos
2. Caracterización fisicoquímica
UNIDAD DIDÁCTICA 2. ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN)
1. Niveles estructurales
-Estructura primaria
-Estructura secundaria
-Estructura terciaria
2. Organizaciones alternativas según el tipo de organismo y el contexto celular
-ADN en organismos procariotas
-ADN en organismos eucariotas
-ADN copia (ADNc)
-ADN en los virus
UNIDAD DIDÁCTICA 3. ÁCIDO RIBONUCLEICO (ARN)
1. Estructura
2. Tipologías
-ARN mensajero (ARNm)
-ARN ribosómico (ARNr)
-ARN de transferencia (ARNt)
-ARN interferente pequeño (ARNsi)
-MicroARN (ARNmi)
-ARN heterogéneo nuclear (ARNhn)
-ARN pequeño nuclear (ARNsn)
-ARN pequeño nucleolar (ARNsno)
UNIDAD DIDÁCTICA 4. FLUJO DE INFRORMACIÓN GENÉTICA
1. Replicación del ADN
-Características
-Enzimas implicadas
-Etapas
2. Transcripción del ADN a ARN
-Enzimas involucradas
-Etapas
-Maduración del ARN en procariontes
3. Traducción del ARNm
-Código genético
-Etapas
UNIDAD DIDÁCTICA 5. ENZIMAS USADAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR
1. Nucleasas
2. Endonucleasas de restricción
-Tipos de corte
-Función en bacterias
-Nomenclatura
-Aplicaciones
3. ADN polimerasas
4. Retrotransciptasas
5. Desoxinucleotidil transferasa terminal (Tdt)
6. Ligasas
7. Topoisomerasas
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 6. EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS I
UNIDAD DIDÁCTICA 1. INTRODUCCIÓN TEÓRICA
1. Protocolo técnico para la obtención de ácidos nucleicos purificados
UNIDAD DIDÁCTICA 2. PRETRATAMIENTO DE MUESTRAS BIOLÓGICAS
1. Sangre
-Obtención y conservación de la muestra
-Lisis de los hematíes
-Aislar células mononucleadas de sangre periférica (PBMC)
2. Cultivos celulares
-Cultivos en suspensión
-Cultivos en monocapa
3. Tejidos animales o vegetales frescos
-Homogeneización mecánica
-Homogeneización química
4. Tejidos fijados en formol e incluidos en parafina (FFPE)
-Desparafinización
5. Otras muestras
-Cultivos de bacterias y levaduras
-Células de la mucosa oral
-Esputo
UNIDAD DIDÁCTICA 3. EXTRACCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
1. Solución de lisis
-Detergentes
-EDTA
-Proteasas
-Agentes caotrópicos
2. Tratamientos en células con pared celular
-Tratamiento enzimático
-Tratamiento mecánico
-Tratamiento con CTAB
3. Verificación del resultado de la lisis
4. Consideraciones en la extracción del ADN
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 7. EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS II
UNIDAD DIDÁCTICA 1. TÉCNICAS DE PURIFICACIÓN DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
1. Purificación con solventes orgánico
2. Precipitación con sales (salting-out)
3. Cromatografía de intercambio iónico
4. Cromatografía de adsorción
5. Purificación mediante esferas magnéticas
-Adsorción de ácidos nucleicos a esferas magnéticas
-Separación magnética por afinidad
6. Ultrafiltración
7. Purificación de plásmidos
-Centrifugación en gradiente de densidad
-Lisis alcalina
8. Consideraciones especiales para la purificación de ARN
-Obtención de agua destilada libre de ARNasa
UNIDAD DIDÁCTICA 2. AUTOMATIZACIÓN EN LA EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN
1. Instrumentos de automatización
UNIDAD DIDÁCTICA 3. ÁCIDOS NUCLEICOS PURIFICADOS
1. Integridad
-Resultados esperados en función del ácido nucleico purificado
2. Pureza
-Cociente A260/A280
-Cociente A260/A230
3. Concentración
-Absorbancia a 260 nm
-Método de fluorescencia
-Conversión de unidades
4. Funcionalidad
UNIDAD DIDÁCTICA 4. SISTEMA DE ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS
1. Mantener la integridad de las muestras
2. Trazabilidad de las muestras
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 8. PCR I
UNIDAD DIDÁCTICA 1. REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA
(PCR)
1. Aplicaciones
2. Ventajas y desafíos
UNIDAD DIDÁCTICA 2. FUNDAMENTOS TEÓRICOS
1. Cebadores
-Diseño
2. ADN polimerasas termoestables
-Clasificación
3. Ciclo básico de una PCR
-Desnaturalización
-Hibridación
-Extensión
4. Productos de amplificación de la PCR
-Primer ciclo
-Segundo ciclo
-Tercer ciclo
-Cuarto ciclo
-Ciclos posteriores
UNIDAD DIDÁCTICA 3. PCR ESTÁNDAR
1. Mezcla de reacción
-Cloruro magnésico
-Desoxinucleótidos trifosfato
-Cebadores
-ADN polimerasa
-ADN molde
-Otros aditivos potenciadores
2. Preparación de las muestras
-Ajuste del volumen de reacción
-Master mix
-Controles positivos y negativos
3. Programación del termociclador
-Protocolo de programación
4. Análisis de los productos amplificados
-Resultado positivo
-Resultado negativo
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 9. PCR II
UNIDAD DIDÁCTICA 1. VARIANTES DE LA PCR ESTÁNDAR
1. PCR con inicio en caliente
2. PCR de grandes fragmentos
3. PCR de alta fidelidad
UNIDAD DIDÁCTICA 2. OTRAS TÉCNICAS DE PCR
1. PCR anidada
2. PCR múltiple
3. PCR con transcripción inversa (RT-PCR)
-Estrategias para la transcripción del ARN molde en ADNc
UNIDAD DIDÁCTICA 3. PCR A TIEMPO REAL
1. Cinética de la amplificación
2. Sistemas fluorescentes de detección de amplicones
-Sistemas independientes de secuencia
-Sistemas específicos de secuencia
3. Aplicaciones
-PCR cuantitativa a tiempo real (qPCR)
-Curvas de fusión y detección de mutaciones
UNIDAD DIDÁCTICA 4. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DE LA PCR
1. Electroforesis en gel de agarosa
-Componentes
-Procedimiento
2. Cromatografía líquida
-Componentes
-Procedimiento
UNIDAD DIDÁCTICA 5. APLICACIONES DIAGNÓSTICAS Y FORENSES DE LAS TÉCNICAS PCR
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 10. TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN CON SONDA
UNIDAD DIDÁCTICA 1. DEFINICIÓN
1. Conceptos básicos
UNIDAD DIDÁCTICA 2. FUNDAMENTOS TEÓRICOS
1. Desnaturalización
-Curva de fusión del ADN
-Temperatura de fusión
2. Renaturalización
-Cinética de renaturalización
-Curvas de renaturalización
-Complejidad del genoma procariota y eucariota
3. Hibridación
-Factores que pueden modificar la Tm
UNIDAD DIDÁCTICA 3. SONDAS DE HIBRIDACIÓN
1. Tipos de sondas
-Sondas de ADN
-Sondas de ARN
-Sondas químicas sintéticas
UNIDAD DIDÁCTICA 4. PROCEDIMIENTO DE MARCAJE
1. Clases de marcadores
-Isótopos radioactivos
-Fluorocromos
-Haptenos
2. Metodologías
-Desplazamiento de mella (nick translation)
-Cebado aleatorio (random priming)
-Marcaje terminal
-Marcaje por PCR
-Marcaje de sondas de ARN
3. Purificación de la sonda marcada
-Cromatografía de exclusión por tamaño
-Cromatografía de adsorción
UNIDAD DIDÁCTICA 5. FASES
1. Preparación de la muestra y el soporte
2. Hibridación
3. Lavado posthibridación
4. Detección del híbrido
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 11. TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS EN FUNCIÓN DEL MEDIO
UNIDAD DIDÁCTICA 1. CLASIFICACIÓN DE LAS TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN
UNIDAD DIDÁCTICA 2. HIBRIDACIÓN EN SOPORTE SÓLIDO
1. Dot blot
-Protocolo
-Aplicaciones
2. Southern blot
-Protocolo
-Aplicaciones
3. Northern blot
-Protocolo
-Aplicaciones
4. Microarrays
-Fabricación
-Protocolo
-Aplicaciones
UNIDAD DIDÁCTICA 3. HIBRIDACIÓN EN MEDIO LÍQUIDO
1. Técnica de captura de híbrido
2. Tecnología del ADN ramificado
UNIDAD DIDÁCTICA 4. HIBRIDACIÓN IN SITU EN TEJIDOS (ISH)
1. Preparaciones para ISH
-Preparaciones de cromosomas en metáfase
-Preparaciones de núcleos interfásicos desnudos
2. Extensiones citológicas
3. Secciones de tejido
4. ISH fluorescente (FISH)
-Protocolo
-FISH interfásica
-FISH metafásica
5. ISH con sondas cromogénicas (CISH)
-Protocolo
-Controles positivos y negativos
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 12. CLONACIÓN MOLECULAR
UNIDAD DIDÁCTICA 1. CLONACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
1. Metodología
-Comparación entre la PCR y la clonación molecular
2. Ventajas
UNIDAD DIDÁCTICA 2. COMPONENTES
1. Vectores de clonación
-Características
2. Células hospedadoras
-Células hospedadoras procariotas
-Células hospedadoras eucariotas
UNIDAD DIDÁCTICA 3. FASES DEL PROCESO DE CLONACIÓN
1. Creación de un vector recombinante
-Preparación del ADN a clonar
-Preparación del vector de clonación
-Inserción del ADN en el vector
2. Introducción del vector en la célula hospedadora
-Transformación bacteriana
-Transfección
-Transducción
-Electroporación
3. Selección e identificación de clones recombinantes
-Genes de resistencia a antibióticos
-Estrategia cromogénica
-Proteínas fluorescentes
-Genes letales
4. Tasa de transformación
UNIDAD DIDÁCTICA 4. BIBLIOTECAS DE ADN
1. Tipologías
-Bibliotecas genómicas
-Bibliotecas cromosómicas
-Bibliotecas de ADNc
2. Proceso de análisis
UNIDAD DIDÁCTICA 5. APLICACIONES DE LA CLONACIÓN MOLECULAR
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 13. SECUENCIACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
UNIDAD DIDÁCTICA 1. CONCEPTUALIZACIÓN
1. Metodologías de secuenciación
UNIDAD DIDÁCTICA 2. MÉTODOS QUÍMICOS
1. Método de Maxam y Gilbert
-Etapas
UNIDAD DIDÁCTICA 3. MÉTODOS ENZIMÁTICOS
1. Método de Sanger
-Fases
2. Variaciones del método de Sanger
UNIDAD DIDÁCTICA 4. SECUENCIACIÓN AUTOMÁTICA DE PRIMERA GENERACIÓN
1. Secuenciadores automáticos de primera generación
2. Reacciones de polimerización
-Métodos de secuenciación
3. Fases automatizadas en secuenciador
4. Secuenciación a gran escala
-Análisis de fragmentos de ADN
-Amplificación múltiple de sondas dependiente de ligamiento (MLPA)
UNIDAD DIDÁCTICA 5. SECUENCIACIÓN DE SEGUNDA GENERACIÓN
1. Fase de preparación del ADN molde
-ADN molde de molécula única
-Amplificación clonal del ADN molde
2. Reacciones de secuenciación
-Terminación reversible cíclica
-Pirosecuenciación
UNIDAD DIDÁCTICA 6. SECUENCIACIÓN DE TERCERA GENERACIÓN
1. Secuenciación ion torrent
2. Secuenciación por nanoporos
UNIDAD DIDÁCTICA 7. SECUENCIACIÓN DE MOLÉCULAS DE ARN
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
MÓDULO 14. APLICACIONES DIAGNÓSTICAS Y FORENSES DE LA BIOLOGÍA MOLECULAR
UNIDAD DIDÁCTICA 1. INTRODUCCIÓN A LA GENÉTICA FORENSE
UNIDAD DIDÁCTICA 2. ORGANIZACIÓN DEL ADN HUMANO
UNIDAD DIDÁCTICA 3. POLIMORFISMOS
1. Polimorfismos de longitud
2. Polimorfismos de secuencia
UNIDAD DIDÁCTICA 4. HUELLA GENÉTICA
1. Polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP)
2. Análisis de STR mediante PCR
3. Análisis de SNP
UNIDAD DIDÁCTICA 5. ANÁLISIS DEL ADN MITOCONDRIAL (ADNmt)
UNIDAD DIDÁCTICA 6. ANÁLISIS DE POLIMORFISMOS DEL CROMOSOMA
Y
UNIDAD DIDÁCTICA 7. ANÁLISIS ESTADÍSTICO DE LOS DATOS
1. Identificación de restos y criminalística
-STR autosómicos
-Cromosoma Y
2. Estudios de paternidad
-Índice de paternidad
UNIDAD DIDÁCTICA 8. BIOINFORMÁTICA
1. Bases de datos secuenciales
-GenBank
2. Análisis de secuencias
-BLAST
3. Diseño de cebadores y sondas
-Primer 3
4. Portales bioinformáticos
RESUMEN
AUTOEVALUACIÓN
SOLUCIONARIO
BIBLIOGRAFÍA COMPLEMENTARIA
Diploma que certifica el “MÁSTER EN BIOLOGÍA MOLECULAR Y CITOGENÉTICA”.
No hay que presentar documentación específica.
